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怎么處理細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的黑點(diǎn)
發(fā)表日期:2023-01-08

在培養(yǎng)細(xì)胞時,我們經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶的內(nèi)部有黑點(diǎn),這些黑點(diǎn)很有可能是受到污染而出現(xiàn)的,那么,如果瓶內(nèi)出現(xiàn)黑點(diǎn),我們該如何處理呢?
瓶子內(nèi)部出現(xiàn)黑點(diǎn),我們首先要判斷這些黑點(diǎn)是不是污染,可以通過黑點(diǎn)的大小、形狀、運(yùn)行速度等方面進(jìn)行判斷,如果判定黑點(diǎn)是污染,我們可以參照以下方法進(jìn)行處理:

怎么處理細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的黑點(diǎn)_富道細(xì)胞

如果是懸浮細(xì)胞:手機(jī)細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶。如果是貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS潤洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打瓶體,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,然后再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。

另外,如果細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)液變渾濁,則說明細(xì)菌污染已經(jīng)比較嚴(yán)重,請及時將細(xì)胞處理后丟棄。避免出現(xiàn)黑點(diǎn)要從培養(yǎng)基PH值、水質(zhì)、器皿的清潔等多方面進(jìn)行注意,在消化細(xì)胞的時候要掌握好時間,防止消化過度產(chǎn)生細(xì)胞碎片。

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