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細(xì)胞培養(yǎng)瓶多用來培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，這類細(xì)胞貼附在瓶子底部生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)到一定程度后，需要將細(xì)胞消化下來再進(jìn)行后續(xù)操作。那我們?cè)撊绾蜗?a href="http://asze.cn/pyfp.html" target="_blank">細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞呢？

由于貼壁細(xì)胞的生長(zhǎng)特性，為了維持細(xì)胞良好的狀態(tài)，我們需要借助特殊的溶液進(jìn)行細(xì)胞消化，也就是胰酶。多數(shù)細(xì)胞消化的時(shí)候只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞（絕大部分1min不到）。

對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法5min還不能消化），這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。

需要注意，不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般我們?nèi)庋塾^察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與細(xì)胞培養(yǎng)瓶材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了，這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化。

細(xì)胞消化的效果直接影響后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，在消化細(xì)胞的時(shí)候我們要注意無菌操作，避免將外源污染引入細(xì)胞培養(yǎng)瓶，影響后續(xù)細(xì)胞生長(zhǎng)。