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我們在細胞培養(yǎng)過程中經(jīng)常會使用凍存管進行細胞凍存，以此來保存細胞和減少細胞活力，當(dāng)我們重新使用凍存細胞的時候就需要進行復(fù)蘇而在實際操作中，凍存細胞要進行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞。

我們在復(fù)蘇的大概流程為：佩戴好實驗物品如眼鏡、手套等，從低溫液氮罐中取出需要復(fù)蘇的凍存管。迅速放入38℃水浴中，并不時搖動，在1分鐘內(nèi)使其完全融化，然后在無菌下取出細胞。然后進行離心之后棄去上層液，在接種在細胞培養(yǎng)瓶或者其他耗材中。在進行觀察，來調(diào)整。之后就可以正常培養(yǎng)細胞。

需要注意的是細胞復(fù)蘇操作時，應(yīng)注意融化凍存細胞速度要快，可不時搖動安瓿或冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復(fù)蘇的凍存細胞存活率高，生長及形態(tài)良好。然而，由于凍存的細胞還受其他因素的影響，有時也會有部分細胞死亡。此時，可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細胞輕輕倒掉，再補以適量的新培養(yǎng)液，也會獲得較為滿意的結(jié)果。